Bioloji tədqiqatlarda uzun bir ardıcıllıqla polipeptidlər ümumiyyətlə istifadə olunur. Ardıcıllıqda 60-dan çox amin turşuları olan peptidlər üçün gen ifadəsi və SDS-səhifəsi ümumiyyətlə onları əldə etmək üçün istifadə olunur. Ancaq bu üsul uzun müddət çəkir və son məhsul ayrılması effekti yaxşı deyil.
Uzun peptid sintezi üçün çətinliklər və həllər
Uzun peptidlərin sintezində həmişə bir problemlə üzləşirik, yəni sintezdə ardıcıllığın artması ilə kondensensasiya reaksiyasının sterikulyasiyasına mane olur və reaksiya müddəti reaksiya vermək üçün tənzimlənməlidir. Ancaq reaksiya müddəti nə qədər uzun olsa, daha çox yan təsirlər istehsal olunur və hədəf peptidin bir hissəsi meydana gəlir. Belə qalıqlar - çatışmazlı peptid zəncirləri uzun peptid sintezində istehsal olunan əsas çirklərdir. Buna görə də uzun peptidin sintezində, aşmalı olduğumuz əsas problem, amin turşusu kondensasiyası reaksiyasını daha əhatəli və dolu etmək üçün yüksək keyfiyyətli reaksiya şərtlərini və reaksiya metodlarını araşdırmaqdır. Bundan əlavə, reaksiya vaxtını azaldın, çünki reaksiya müddəti nə qədər uzun müddət, nəzarətsiz yan reaksiyalar, əlavə məhsullar daha mürəkkəbdir. Buna görə aşağıdakı üç nöqtə ümumiləşdirilmişdir:
Mikrodalğalı sxem syntez istifadə edilə bilər: İnteqrasiya edilmək asan olmayan sintez prosesində rast gəlinən bəzi amin turşuları üçün, mikrodalğalı synthez istifadə edilə bilər. Bu üsul əlamətdar nəticələr verdi və reaksiya vaxtını çox azaldır və iki əsas məhsulun formalaşmasını azaldır.
Fraqment sintez metodu istifadə edilə bilər: Bəzi peptidlərin ümumi sintez üsulları ilə sintez edilməsi və təmizlənməmək asan olmadıqda, peptidin müəyyən bir seeptində bir neçə amin turşusunun bütövlükdə peptid zəncirinə qədər bir neçə amin turşusunu qəbul edə bilərik. Bu üsul sintezdə bir çox problemi də həll edə bilər.
Acylhydrazide sintezi istifadə edilə bilər: Peptidlərin Acylhydrazide sintezi, n-terminal CYS peptidinin bərk faza sintezi və peptid bağlama metoduna nail olmaq üçün amid bağlarının əmələ gəlməsi arasında C-terminal polipeptid kimyəvi seçmə reaksiyasıdır. Peptid zəncirindəki CYS mövqeyinə əsasən, bu üsul bütün peptid zəncirini çox ardıcıllıqla bölür və müvafiq olaraq sintez edir. Nəhayət, hədəf peptid maye fazalı kondensasiya reaksiyası vasitəsilə əldə edilir. Bu üsul uzun peptidin sintez vaxtını çox azaltmaqla yanaşı, son məhsulun saflığını da əhəmiyyətli dərəcədə artırır.
Uzun peptid təmizlənməsi
Uzun peptidlərin xüsusiyyəti qaçılmaz olaraq xam peptidlərin mürəkkəb komponentlərinə səbəb olur. Buna görə də, HPLC tərəfindən uzun peptidləri təmizləmək üçün bir problemdir. amiloid polipeptid təmizləyici prosesin amiloid seriyası, çox təcrübəni udmaq və uzun peptidin təmizlənməsində uğurla istifadə olunur. Yeni avadanlıq qəbul etməklə, birdən çox təmizlənmə sisteminin qarışdırılması, təkrar ayrılıq və digər təcrübə metodları, uzun peptid təmizlənməsinin müvəffəqiyyət dərəcəsi çox yaxşılaşdırıldı.
Time: 2025-07-03