Bioloji tədqiqatlarda adətən uzun ardıcıllığa malik polipeptidlərdən istifadə olunur.Ardıcıllıqda 60-dan çox amin turşusu olan peptidlər üçün onları əldə etmək üçün ümumiyyətlə gen ifadəsi və SDS-PAGE istifadə olunur.Lakin bu üsul çox vaxt aparır və son məhsulun ayrılması effekti yaxşı deyil.
Uzun peptid sintezi üçün problemlər və həllər
Uzun peptidlərin sintezində həmişə bir problemlə qarşılaşırıq, yəni sintezdə ardıcıllığın artması ilə kondensasiya reaksiyasının sterik maneəsi artır və reaksiyanın tam olması üçün reaksiya vaxtını tənzimləmək lazımdır.Bununla belə, reaksiya müddəti nə qədər uzun olarsa, bir o qədər çox yan təsirlər yaranır və hədəf peptidin bir hissəsi əmələ gəlir.Belə qalıqlar - çatışmazlığı olan peptid zəncirləri uzun peptid sintezində əmələ gələn əsas çirklərdir.Buna görə də, uzun peptidin sintezində həll etməli olduğumuz əsas problem, amin turşusu kondensasiyası reaksiyasını daha əhatəli və dolğun etmək üçün yüksək keyfiyyətli reaksiya şərtlərini və reaksiya üsullarını araşdırmaqdır.Bundan əlavə, reaksiya müddətini azaldın, çünki reaksiya müddəti nə qədər uzun olarsa, idarə olunmayan yan reaksiyalar bir o qədər çox olarsa, əlavə məhsullar bir o qədər mürəkkəbdir.Beləliklə, aşağıdakı üç məqam ümumiləşdirilir:
Mikrodalğalı sintezdən istifadə edilə bilər: Sintez prosesində rast gəlinən və inteqrasiyası asan olmayan bəzi amin turşuları üçün mikrodalğalı sintezdən istifadə edilə bilər.Bu metod əla nəticələrə malikdir və reaksiya müddətini xeyli azaldır və iki əsas əlavə məhsulun əmələ gəlməsini azaldır.
Fraqment sintezi metodundan istifadə edilə bilər: Bəzi peptidləri ümumi sintez üsulları ilə sintez etmək çətin olduqda və təmizlənmək asan olmadıqda, peptidin müəyyən bir seqmentində bir neçə amin turşusunun bütün kondensasiyasını bütövlükdə peptid zəncirinə qəbul edə bilərik.Bu üsul sintezdə bir çox problemləri də həll edə bilər.
Asilhidrazid sintezindən istifadə edilə bilər: peptidlərin asilhidrazid sintezi, peptid bağlama üsuluna nail olmaq üçün amid bağlarının formalaşması arasında N-terminal Cys peptid və C-terminal polipeptid hidrazid kimyəvi seçmə reaksiyasının bərk fazalı sintez üsuludur.Peptid zəncirindəki Cys mövqeyinə əsaslanaraq, bu üsul bütün peptid zəncirini çoxlu ardıcıllığa bölür və müvafiq olaraq sintez edir.Nəhayət, hədəf peptid maye fazalı kondensasiya reaksiyası vasitəsilə əldə edilir.Bu üsul nəinki uzun peptidin sintez vaxtını xeyli azaldır, həm də son məhsulun saflığını əhəmiyyətli dərəcədə artırır.
Uzun peptidlərin təmizlənməsi
Uzun peptidlərin özəlliyi qaçılmaz olaraq xam peptidlərin kompleks komponentlərinə gətirib çıxarır.Buna görə də, uzun peptidləri HPLC ilə təmizləmək də bir problemdir.amiloid seriyası polipeptidlərin təmizlənməsi prosesi, çox təcrübə mənimsəyir və uzun peptidin təmizlənməsində uğurla istifadə olunur.Yeni avadanlıqların qəbulu, çoxlu təmizləmə sistemlərinin qarışdırılması, təkrar ayırma və digər təcrübə üsulları, uzun peptidlərin təmizlənməsinin müvəffəqiyyət dərəcəsi çox yaxşılaşdırıldı.
Göndərmə vaxtı: 18 aprel 2023-cü il