Rekombinant zülal antigenləri çox vaxt bir neçə fərqli epitopa malikdir, onlardan bəziləri ardıcıl epitoplar, bəziləri isə struktur epitoplardır.Heyvanların denatürləşdirilmiş antigenlərlə immunizasiyası nəticəsində əldə edilən poliklonal anticisimlər ayrı-ayrı epitoplara xas olan antikorların qarışıqlarıdır və ümumilikdə təbii strukturları və ya denatürasiya olunmuş hədəf zülalları aşkar etmək üçün istifadə oluna bilər.Denatürləşdirilmiş zülalların immunogenlər kimi istifadə edilməsinin əlavə faydası ondan ibarətdir ki, denatürləşdirilmiş zülallar daha çox immunogendirlər və heyvanlarda güclü immun reaksiyanı stimullaşdıra bilirlər.
Escherichia coli-nin ifadə sistemi adətən antigenik məqsədlər üçün seçilir, çünki vaxt və pul baxımından ən bahalı sistemdir.Hədəf zülalının ifadə imkanını və təmizlənmənin rahatlığını yaxşılaşdırmaq üçün bəzən hədəf zülalın yalnız kiçik bir fraqmenti, məsələn, müəyyən bir domen ifadə edilir.
Zülalların üçölçülü quruluşu
Zülalın Xüsusi Sahəsi
Anticisimlərin hazırlanmasının məqsədi yalnız zərdab zərdabının aşkarlanmasıdırsa, antigen kimi sintetik kiçik peptiddən istifadə etmək qənaətcil və sürətlidir, lakin peptid seqmentinin düzgün seçilməməsi səbəbindən zəif immunogenlik və ya qeyri-regeniklik riski var.Antikor hazırlığı uzun müddət tələb etdiyindən, təcrübənin müvəffəqiyyət dərəcəsini təmin etmək üçün polipeptid antigenindən istifadə edərək antikor hazırlamaq üçün tez-tez iki və ya üç müxtəlif peptid seqmenti seçilir.
İmmunizasiya üçün polipeptid antigenin saflığının 80%-dən çox olması tələb olunur.Daha yüksək saflıq nəzəri olaraq daha yaxşı spesifikliyə malik antikorlar əldə edə bilsə də, praktikada heyvanlar həmişə çoxlu sayda qeyri-spesifik anticisimlər istehsal edir və bununla da antigen təmizliyinin faydalarını maskalayırlar.
Bundan əlavə, kiçik peptidlərdən antikorların hazırlanması onun immunogenliyini artırmaq üçün müvafiq daşıyıcı antigenlə çarpaz əlaqələndirilməlidir.İki ümumi antigen daşıyıcısı KLH və BSA-dır.
Göndərmə vaxtı: 23 mart 2023-cü il